БЕЛЬШОВСНОГО МЕТОД
Спасибо нашим инвесторам из казино онлайн
БЕЛЬШОВСНОГО МЕТОД
(Bielschowsky), для окраски неврофибриллей. 1. Фиксация 10—20% формалином от 3 дней и более. Optimum с 3 до 9 недель. При коротких сроках лучше фиксировать при t° 37°.—2. Промывка 2—3 часа в текучей воде и 24—48 часов в дестиллированной воде.—3. Резка на замораживающем микротоме на 5—10
fi.
Срезы переносятся в дестиллированную воду.—4. Стеклянной палочкой срезы переносятся на 24 часа в 2% Argentum nitricum chem. pur. Обычно приготовляется 10% раствор Arg. nitrici, к-рый и разводится дест. водой.—5. Проведение через аммиачное се-дэебро и редукция формалином. Посуда—измерительные цилиндры и кристаллизаторы (моются технической серной кислотой). Аммиачное серебро приготовляется ex tem-роге. К 20
куб. см
2% AgN03 прибавляют 5 капель 40% NaOH; получается бурый осадок, к-рый растворяется аммиаком, прибавляемым по каплям; NH, OH (Liquor am-monii caustici triplex), так же как и раствор NaOH, надо чаще менять. Искусство приготовления заключается в том, чтобы не прилить ни одной лишней капли аммиака. Для этого лучше сразу прилить то количество аммиака, к-рое по опыту необходимо для растворения. Во время растворения следует помогать растворению легким потряхиванием цилиндра. По прежней прописи бралось 5
куб.
еж 10 % AgNOj и приливалось 5 (можно 4) капель 40% едкого натра. Т. к. осадок лучше растворяется в избытке аммиака, можно, сразу прибавив 5 крупных капель аммиака, не взбалтывать жидкости, а оставив в целости образующееся наверху ее светлое кольцо аммиака, легкими потряхиваниями поднимать в это кольцо облачка осадка. После растворения осадка надо прилить дестиллированной воды до 40
куб. см
(по прежней прописи—от 5
куб. см
до 20
куб. см).
Процедура редукции: берут 4 кристаллизатора: 1) с дестиллированной водой, 2) с аммиачным серебром, 3) с дест. водой и 4) с 20% формалином. Срезы переносят каждый в отдельности на несколько секунд в дест. воду, потом минут на 5 в аммиачное серебро, где они еще более буреют и расправляются, затем на несколько секунд снова в дест. воду и, наконец, в формалин. Можно переносить после аммиачного серебра не через одну, а несколько чашечек с дест. водой, но обязательно быстро. В формалине срезы темнеют; восстановление идет очень быстро.— 6. Золочение и фиксирование (не обязательно, но желательно): 1)дест. вода; 2) хлорное золото, к 10
куб. см
дест. воды прибавляются 3—5 капель 1 % Auri chlorati (желтого тона), держать срез до появления стального цвета; 3) 5% гипосульфит 20—60 сек.; 4) вода.—7. Спирты восходящей крепости, карбол-ксилол; ксилол и канад. бальзам. Модификации Б. м.: 1. Для получения особых цилиндров срезы можно на 24 часа положить в чистый пиридин, потом в течение нескольких часов отмыть его в дестилл. воде, далее 2% Arg. nitr. и т. д. 2. Для импрегнации в кусочках: 1) после формалиновой фиксации и промывания кусочек кладется на 3 дня в чистый пиридин при комнатной t°; 2) дест. вода несколько часов; 3) 3%Arg. п. при 36°—3 дня; 4) быстро — дест. вода и далее аммиачное серебро на 24 часа; разведение амм. серебром делается до 60
куб. см;
5) дест. вода до 1 часа; 6) 20% формалин; 7) вода; заключение в парафин; 8) резка; освобождение от парафина; 9) золочение, фиксаж и т. д.—Вместо формалина Б. рекомендует для редукции также 20%
виноградный сахар или след. смесь: 75,0 куб. см виногр. сахара (30%); 75 куб. см Сегне-товой соли (10%); 20 куб. см поташа (10%) и 5 куб. см чистого формола. Для всех процедур желательно пользоваться бидестил-лированной водой.
Лит.: Enzyklopadie d. mikroskopischen Technik, herausg. v. K.Krause, В. Ill, p. 1684, 1927. П. Снесарев.