ЛЕФЛЕРА МЕТОДЫ ОКРАСКИ

ЛЕФЛЕРА МЕТОДЫ ОКРАСКИ, СРЕДЫ.— 1. Генцианвиолет, или метилвио-л е т. К 100 см3 свежеприготовленной 1%-ной или 2 %-ной карболовой воды добавляется 10 см3 насыщенного спиртового раствора генцианвиолета или метилвиолета (6 В или BN). Красящая способность усиливается от добавления 1 см3 алкогольного раствора метиленовой синьки на каждые 10 см3 указанного раствора метилвиолета. Распространенная краска для окрашивания бактерий.—2. Л. модификация способа Г р а м а. Окрашивают объект в указанном растворе метил – или генцианвиолета 10 мин., промывают в воде, иодируют 2 минуты в Люголевском растворе, погружают на 1 мин. в 5%-ный водный раствор серной или азотной к-ты (или на 10 сек. в 3%-ный раствор соляной), обесцвечивают в абсолютном алкоголе. Ксилол. Канадский бальзам. Способ применяется для окраски бактерий в тканевых срезах.—3. Метиленовая синька. К 30 см3 насыщенного алкогольного раствора метиленовой синьки добавляется 100 см3 0,01%-ного раствора КОН (на 100 см3 дестил. воды 1 см3 1%-ного раствора КОН). Одна из распространенных в бактериологии красок для окрашивания бактерий в мазках, содержащих клеточные элементы; бактерии окрашиваются сильнее, нежели фон из клеточных элементов.—4. Окраска гонококков, а) Фиксация препаратов течение 40 мин. в смеси спирта и эфира (аа); б) окрашивание в течение 1 минуты при легком нагревании в растворе из 4 частей раствора 2,5 г буры иг 1 г метиленовой синьки в 100 см3 дестил. воды, 1 части полихром-ной метиленовой синьки Unna и 5 частей 0,05%-ного водного раствора Bromeosin extra В или extra A. G. (Hochst); в) промывание водой; г) обесцвечивание в растворе из 177 частей 95°-ного спирта, 20 частей 1°/о0-ного раствора бром-эозина и 3 частей уксусной кислоты; д) промывание водой, высушивание.—Клетки бледнорозового цвета, ядра—бледносинего, гонококки—темносинего. 5. Окраска дифтерийных бац и л. а) Фиксация на легком пламени; б) окрашивание в течение 10 сек. в растворе из 4 частей раствора буры и метиленовой синьки (2,5 г буры + 1 г метилен, синьки + 100 см3 дестил. воды), 1 ч. полихромной метиленовой синьки (Griibler), 5 частей 0,05%-ного раствора Bromeosin extra A. G. (Hochst); в)& промывание водой; г) обесцвечивание в течение 10 сек. в растворе из смеси 500 см3 25%-ной уксусной к-ты, в к-рой растворен 0,01 г Tropaeolin 00, и 500 см3 спиртового раствора бисмаркбрауна (1 г бисмаркбрауна на 500 см3 Alcohol, absolut.); д) промывание водой, высушивание. Зерна дифтерийных бацил окрашиваются в черный цвет.— 6. Окраска жгутиков. Протрава: 10 см3 20 %-ного водного раствора танина вмешиваются с 5 еж3 насыщенного на холоду раствора сернокислого железа или аммиачных квасцов; добавляется 1 см3 водного или спиртового раствора фуксина, ме-тилвиолета или Wollschwarz.—б к р а ш и-в а н и е. а) Фиксация троекратным проведением через пламя; б) протрава в течение */*—1 мин. с нагреванием до появления паров (по мнению др. авторов необходимо протравить 3—4 раза по 10 сек., смывая в промежутках протраву водой); в) промывание сильной струей воды; г) промывание спиртом для удаления осадка; д) окрашивание в течение 3—4 мин. анилиноводным фуксином •с нагреванием (обычный раствор краски подщелачивается добавлением 1 см31 %-ного раствора NaOH на каждые 100 см3 краски; щелочь можно добавлять и в большем количестве—до начала помутнения раствора); необходимо пользоваться свежим раствором; для окрашивания можно применять концентрированный карболовый фуксин или спиртоводный фуксин; е) промывание водой, высушивание. Указанный способ весьма рекомендуется для окраски жгутиков группы coli-typhus, больших спирил, рго-teus, группы сенной палочки; для окраски холерных и других вибрионов более пригоден способ Цетнова (Zettnow). Способ Леф-лера может применяться для окраски бактериальных капсул.—7. Антиформин-х л ор о формный метод’* обнаружения туб. бацил. Мокрота смешивается с равным количеством 50%-ного антифор-мина, кипятится; прибавляют к 10 см3 раствора 1,5 см3 10 %-ного раствора хлороформа в спирте, энергично встряхивают, центрифугируют 15 минут. Берут пастеровской пипеткой образовавшийся между хлороформом и антиформином слой, размешивают с небольшим количеством белкового раствора на стекле, фиксируют и красят.—8. Окраска сапных бацил. а) Фиксация троекратным проведением препарата через пламя; б) окрашивание в течение 5 мин. в щелочном растворе метиленовой синьки; в) обесцвечивание погружением в 1%-ную уксусную кислоту, имеющую цвет белого вина от добавления водного раствора Tropaeolin’а; г)& промывание дестил. водой; высушивание. От воздействия тропеолина происходит обесцвечивани

Изучайте:

  • УЛЬТРАМИКРОШОПИЯ
    УЛЬТРАМИКРОШОПИЯ, УЛЬТРАМИКРОСКОП. Главнейшей задачей ультрамикроскопии является создание таких условий наблюдения, при...
  • КСЕРОФТАЛЬМИЯ
    КСЕРОФТАЛЬМИЯ, xerophthalmia (от греч. xeros — сухой и ophthalmos—глаз; дословно «сухость глаза»), своеобра...
  • ВЕЛИКОБРИТАНИЯ
    ВЕЛИКОБРИТАНИЯ (санитарное состояние и постановка здравоохранения). Великобритания (без ее колоний, т. е. Англия и Уэль...
  • СМЕРТЬ
    СМЕРТЬ, необратимое прекращение основных жизненных свойств организма, его дыхания, кровообращения и обмена веществ. Опр...
  • МАЗКИ
    МАЗКИ в бактериологической и гематологической (см. Кровь) технике представляют материал, тонким слоем намазанный и высу...