ФЛОКУЛЯЦИЯ
Спасибо нашим инвесторам из казино онлайн
ФЛОКУЛЯЦИЯ
, реакция осаждения, наступающая между токсином и специфической к нему антитоксической сывороткой. Ф. представляет собой частный случай иммунологической реакции преципитации. В 1923 г. Ф. была предложена Районом (Ramon) для титрования антитоксической силы сывороток и антигенной силы токсинов. Реакция состоит в том, что при смешении токсина с соответствующей иммунной сывороткой происходит помутнение в ряде пробирок. Сначала в одной из них, а затем и в других ближайших к ней выпадает хлопьевидный осадок (фдокулят). Этот ряд давших помутнение и осадок пробирок называется «зоной флокуляции», а пробирка, в к-рой раньше других выпал флокулят, называется пробиркой «инициальной» флокуляции. Выпадение осадка происходит при условии полной нейтрализации токсина антитоксином. Инициальная Ф. обычно соответствует той предельной дозе антитоксической сыворотки, к-рая еще способна обезвредить данное количество токсина. Поэтому по инициальной Ф. можно вычислить антитоксический титр сыворотки. С другой стороны, зная сколько антитоксических единиц содержится во взятой дозе сыворотки, можно по инициальной Ф. определить и антигенную силу токсина. Постановка реакции Ф. производится следующим образом: в ряд пробирок наливают определенные равные количества токсина и убывающие количества антитоксической сыворотки. Пробирки встряхивают, помещают на водяную баню при 40—45° и наблюдают за порядком и временем появления сначала мути, а затем и хлопьев флокулята. Имеется несколько модификаций в постановке реакции Ф., отличающихся лишь количеством ингредиентов (Рамон, Glenny). По Ра-мону, токсин берется в объеме 20
см3,
а сыворотку добавляют в неразведенном состоянии, причем объемы смесей не уравниваются, Глен-ни
же
токсин берет в объеме 1—2 си8, а сыворотку, разведенную от 1 : 5 до 1 : 40 (сильные сыворотки), дозирует микропипеткой ила мш:-рошприцем. Шольц в целях экономии токсина и сывороток употребляет токсин в объеме 2 см3 и сыворотку разводит таким образом, чтобы при ее прибавлении всегда сохранялся одинаковый объем смеси. Методика эта однако сложна и громоздка, она требует специального подбора стандартных токсинов и производства большого количества разведений сыворотки. Поэтому в современной практике она оставлена.—Особняком стоит метод Дайера (Dyer), по к-рому токсин наливается в пробирки в возрастающих, а сыворотка в убывающих количествах таким образом, чтобы содержимое пробирок было равно по объему (4 еж3). Последний метод нашел применение при титровании антибактериальных сывороток, особенно при условии, если титр их неизвестен. Этим методом удается быстро найти зону Ф.—Кроме наблюдения за появлением инициальной Ф. отмечается и время, к-рое проходит от момента смешения ингредиентов до появления этой Ф.
{Kf).
По мнению Рамона, не разделяемому другими исследователями, показатель времени
(Kf)
может служить для определения авидитета сывороток. Чем авидитет сыворотки больше, тем быстрее происходит реакция. Данные многочисленных наблюдений говорят о достаточной практической пригодности метода Ф., однако описаны случаи отсутствия этого феномена у некоторых токсинов, а также случаи несовпадения антитоксических титров сывороток, определяемых по флокуляции и на животных (Гленни, Moloney, Sordelli и Serpa). Причина этих явлений еще не ясна. Вторым осложняющим моментом реакции нужно считать появление при ней иногда нескольких зон Ф. (Гленни, Шмидт и Шольц, Рамон и др.). Причина появления этих зон также еще не ясна. Гленни считает специфической лишь зону нейтрализации токсина антитоксином. Объяснения другой зоны он не дает, рассматривая ее как неспецифическое явление. Шмидт и Шольц, как и Гленни, считают специфической только первую зону, вторую же зону они связывают с взаимодействием между преципитином сыворотки и преципитиногеном токсина.—Все указанные обстоятельства заставляют расценивать Ф. как подсобный метод, позволяющий сократить число опытных животных. По вопросу о сущности Ф. существует несколько гипотез. Так, Рамон, Шмидт и Шольц, Гленни считают, что при этой реакции происходит соединение токсина и антитоксина; соединение это выпадает вместе с адсорбирующим его белком. Другие (Цингер, Бронфенбреннер) отождествляют эту реакцию с реакцией преципитации, Moerch высказывает предположение о существовании в сыворотке т. н. «фдокудина», а в токсине «флокулиногена» как отдельных субстанций, взаимодействующих между собой и выпадающих при этой реакции. Этот краткий перечень гипотез
говорит о том, что мы еще далеки от уяснения сущности реакции Ф., практическое же значение этой реакции настолько бесспорно, что она получила повсеместное распространение в практике ин-тов, изготовляющих сывороточные препараты. Лит.: Архипов К. и Новгородская Э., К вопросу о флокуляции, Микробиол. шурн., т. IV, вып. 1, 1927; Елисуйекий М., Опыт изучения флокулирующих, resp. преципитирующих свойств антибактерийных сывороток, ibid., т. XІII, вып. i, 1931; Здродовский П. и Халяпина К., Активная иммунизация дифтерийным анатоксином, Тр. Азербайджанского ин-та микробиологии и гигиены, вып. 2—3, Баку, 1925—26; Левин Я. и Ф е й г и и а С, К вопросу о флокулирующих свойствах противоскарлатинной сыворотки, Журн. эпидемиол. и микробиол., 1932, № 9— 10; X а л я п и и а К. и А с р и е в а Т., О флокули-рующей способности скарлатинозного стрептококкового фильтрата и ее вначении, Микробиол. журн., т. VІI, вып. 2, 1928; Dyer R., Application of the Ramon floc-culation principle to the titration of scarlet fever streptococcus toxin and antitoxin, Publ. health rep., v. XL, 1925; G I e n n у А. а. О k e 1 1 C, The titration of diphtheria toxin and antitoxin by flocculation methods, Journ. of patli. a. bacteriol., v. XXVІI, 1924; Moerch J., La reaction de Ramon, Compt. rend, de Soc. de blol., v. CVІII, 1931 ;-M о 1 о n e у P. a. We id C, Diphtheria toxin-antitoxin flocculation, Journ. of path. a. bacteriol., v. XXVІII, 1925; Ramon G., Floculation dans un melange de toxine-antitoxine dipbteriques, Ann. de l’inst Pasteur, v. XXXVІI, 1923; Schmidt H., Zur Kenntnls der Natur der Diphtherie — Toxin — Antitoxin — Flockung, Zeitschr. f. Immunitatsf. u. exp. Therap., B. XLVІII, 1928; Schmidt H. u. S с h о 1 z W., Studien гиг Kenntnls der Eigenschaften von Diphtherie— Toxin—Antitoxin— Gemische, Arch. f. Hyg., B. XCV, 1925; Scholz W., Ober die Brauchbarkeit der FIo-ckungsreaktion №r die Auswertung antitoxischer Sera, Zentralbl. Г. Bakt., Orlg., B. XCI, 1923; Sordelli A. et Serpa R., Titrage du serum antidiphterique par la methode de Rartion, Compt. rend, de Soc. de biol., v. XCI, 1954. В. Крестовников».