ГРАМА МЕТОД

ГРАМА МЕТОД, предложенный Грамом в 1884 году и получивший широкое распространение метод окраски определенных видов бактерий, состоящий в том, что препарат перекрашивается розанилиновой краской (Methylviolett, Krystallviolett, Gentian-violett, Viktoriablau), после чего подвергается действию раствора Люголя, а затем дифе-ренцируется спиртом. Одни бактерии окрашиваются в черно-синий цвет, тогда как другие бактерии, а также элементы тканей (за исключением хроматина делящихся ядер, зернышек базофильных клеток и рогового слоя эпидермиса) спиртом обесцвечиваются. Все обесцвеченные элементы тканей и микроорганизмы дополнительно окрашиваются контрастной краской (эозином, фуксином, Neutralrot и т. д.). Бактерии, удерживающие окраску, носят название Грам-позитив-ных, а обесцвечивающиеся—Грам-негатив-ных. Для окраски нужны: 1. Анилиново-водный раствор генциан-виолет по Эрли-ху (сохраняется не более трех дней). К 100 см3 4-процентной анилиновой воды прибавляют 11 см3 насыщенного спиртного раствора генциан-виолет. 2. Раствор Лю – голя—J—1,0, KJ—2,0, Н20—300,0. Вместо генциан-виолет на анилиновой воде сейчас пользуются карболовым раствором его: 1,0 генциан-виолет растворяют в 10 см3 абс. спирта, прибавляют 2,0 карбол. кислоты и затем 100 см3 воды.’—Окраска мазков: 1. Красят фиксированный мазок 3— 5 мин. обязательно только-что профильтрованной краской. 2. После этого, не промывая, действуют 1 мин. раствором Люголя. 3. Сливают Люголь и мазок переносят в спирт, пока не перестанут отходить облачка краски. 4. Тщательно промывают водой (правильно обесцвеченный препарат должен иметь после промывания серо-стальной цвет). 5. Докрашивают 3—5 мин. карболовым фуксином Пфейфера, 1,5%-ным раствором Neutralrot или 2%-ным водным раствором везувина.— Окраска срезов: 1. Литиевый кармин 30 мин.—1 час. 2. Промывка в воде. 3. Карболовый или анилиновый генциан-виолет 5—10 мин. 4. Раствор Люголя 1—2 минуты. 5. Диференцируют спиртом, пока не перестанут отходить облачка краски; масло (гвоздичное, бергамотное), ксилол, заключение в бальзам. Этот основной метод Гра-ма имеет много модификаций, которые сводятся к замене спирта другими обесцвечивающими жидкостями, а генциан-виолет— другими парарозанилиновыми красками. (См. также Фибрин, окраска.) Теория этой окраски не вполне выяснена. Существует 2 мнения. Одни (Stoelzner, F. Reichert) объясняют ее чисто химически: жирные кислоты, липоиды и восковидные субстанции благодаря иоду энергично фиксируют амидо-фенил-ме-таны и образуют с краской соединения спир-то – и кислотоустойчивые. Другие (Hottinger) считают, что различная способность бактерий окрашиваться зависит от степени дисперсности нуклеопротеидов внутри клетки. Чем меньше степень дисперсности, тем реакция (окраска) более положительна, потому что оптическое разрешение окрашенных частиц стоит в прямой зависимости от размера этих частиц. Лит.: Gram С, tjber die isolierte Farbimg der Schizomyceten, Fortschrltte der Medizin, B. II, № 6, 1884; Gramsche Farbimg (Enzyklopadie der mikrosko-pischen Technik, herausgegeben v. R. Krause, B. II, Berlin—Wien, 1926). А. Саватесв.

Изучайте:

  • ГЕЛЬМИНТОЛОГИЯ
    ГЕЛЬМИНТОЛОГИЯ (от греч. helmins— паразитический червь и logos — слово, наука), наука, изучающая мир паразитических чер...
  • АРТРИТЫ
    АРТРИТЫ (от греч. arthron — сустав), обширная группа заболеваний суставов воспалительного и не воспалительного происхож...
  • БЕСПОЗВОНОЧНЫЕ
    БЕСПОЗВОНОЧНЫЕ (Evertebrata), совокупность всех животных, не имеющих позвоночного столба; Б. противополагаются позвоноч...
  • АЗОТ-ФИКСИРУЮЩИЕ БАКТЕРИИ
    АЗОТ-ФИКСИРУЮЩИЕ БАКТЕРИИ, бактерии, могущие питаться свободным N атмосферы, совершенно непригодным для питания большин...
  • КИСЕЛЬ
    КИСЕЛЬ, Александр Андреевич (родился в 1859 году), известный педиатр, профессор 2 МГУ. Окончил Киевский ун-т в 1883 г.,...